导读：本研究聚焦于由横纹肌溶解症引发的急性肾损伤（AKI）这一临床难题，深入探讨了巨噬细胞外陷阱（METs）在这一过程中的关键作用。研究首次揭示了血小板激活如何诱导巨噬细胞释放METs，进而加剧AKI的全新机制，并发现了针对这一机制的潜在治疗策略，为横纹肌溶解症引发的AKI治疗提供了新思路。

背景介绍

横纹肌溶解症是一种由骨骼肌损伤引起的严重综合征，受损肌细胞分解产物进入全身循环，可能导致危及生命的并发症，如急性肾损伤（AKI）。其发生通常与剧烈运动、肌肉缺氧、药物或药物滥用有关。在压榨综合征的情况下，损伤的肌肉释放肌红蛋白，可能触发AKI。尽管已有研究将巨噬细胞与肌溶解所致AKI的病理联系起来，但确切的分子机制尚不清楚。

研究方法

1. 动物模型构建

研究者采用小鼠模型，通过向小鼠肌肉内注射甘油诱发横纹肌溶解症，观察肾脏损伤情况。同时，利用基因敲除技术培育特定基因缺失小鼠，如PAD4基因敲除（Padi4−/−）小鼠，并借助药物抑制剂（如CLA）干预特定信号通路，以对比不同处理组小鼠在肾脏损伤指标上的差异。

2. 细胞类型耗竭实验

研究者通过特定手段耗竭巨噬细胞、中性粒细胞及血小板，以研究它们在横纹肌溶解症引发AKI中的具体贡献。对比耗竭与对照组小鼠的肾脏损伤指标，可以明确各细胞类型在病理过程中的作用。

3. 免疫组化与免疫荧光染色

利用免疫组化和免疫荧光技术，研究者对小鼠肾脏组织进行染色，以检测METs的存在与分布。特异性标记抗体（如CitH3、F4/80等）的使用，以及荧光显微镜观察，帮助分析METs与肾脏损伤区域的关联。

4. 体外细胞实验

研究者体外培养THP-1单核细胞系，并诱导其分化为巨噬细胞，模拟血小板激活及METs形成过程。通过预处理巨噬细胞（如加入DNaseI、DPI、CLA等），观察不同干预下METs形成的情况，探索血小板激活、ROS生成和PADs活性等环节对METs形成的影响。

研究结果

1. METs在横纹肌溶解症引发AKI中的作用

结果显示，在横纹肌溶解症模型小鼠的肾脏中，METs以无定形DNA结构存在，并与citrullinated histone H3（#CitH3）共定位，仅出现在肾小管中而不在肾小球中。PAD4基因敲除小鼠及经PAD抑制剂CLA处理的小鼠，其血清肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）等AKI指标显著降低，肾脏损伤程度减轻，表明METs在AKI中扮演了关键角色。

2. 巨噬细胞与血小板的协同作用

研究表明，巨噬细胞及血小板的耗竭均显著减轻横纹肌溶解症导致的肾脏损伤，而中性粒细胞耗竭无此效果。免疫荧光染色结果显示，CitH3仅与巨噬细胞标记F4/80共定位，未见中性粒细胞标记Ly6G的共定位。此外，研究发现血小板激活后，与巨噬细胞上的Mac-1受体结合，触发ROS生成及histone citrullination，促进METs形成。

3. 潜在治疗策略

研究者尝试应用多种药物，发现血色素结合蛋白（hemopexin）能有效抑制NET及MET形成，减轻AKI损伤。此外，乳铁蛋白（Lf）在体外实验中显著减少血小板诱导的MET形成，并在体内实验中预防甘油诱导的横纹肌溶解症引发的肾脏损伤。

讨论

本研究首次阐明了METs在横纹肌溶解症引发的AKI中的关键作用，明确了血小板激活、巨噬细胞参与及ROS、PADs等环节在METs形成中的重要性。研究证实了巨噬细胞与血小板间的协同作用，提示该通路的干预可能成为治疗AKI的新策略。研究中发现的hemopexin及Lf等药物展现了对横纹肌溶解症引发的AKI的潜在治疗效果，为临床治疗提供了新思路。未来的临床试验将验证这些药物的疗效与安全性，期望能为横纹肌溶解症患者带来新的治疗选择。

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